Real time pcr目的基因Ct值相差1,内参差不多是怎么回事?做了2次都这样,不想是加样的问题

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/09 12:10:46
Real time pcr目的基因Ct值相差1,内参差不多是怎么回事?做了2次都这样,不想是加样的问题

Real time pcr目的基因Ct值相差1,内参差不多是怎么回事?做了2次都这样,不想是加样的问题
Real time pcr目的基因Ct值相差1,内参差不多是怎么回事?做了2次都这样,不想是加样的问题

Real time pcr目的基因Ct值相差1,内参差不多是怎么回事?做了2次都这样,不想是加样的问题
用内参的方式进行realtime定量是不需要考虑加样量和反转录效率的问题的,因为结果都是和内参比,和内参同多同少.
realtime不准是很常见的事,rna降解、引物特异性差、模板太浓或太稀等等许多因素都会影响,因此要优化,并多做对照和平行
还有如果你定的是质粒上的基因,用内参就不可靠了,因为质粒的拷贝数是随细胞而异的

恩 加样手抖了吧 平行性太差了会不会是模板的问题呢?我提了RNA后没跑电泳直接反转录,只测了OD值和浓度,浓度都是在1000ug/ul左右的,260/280也在1.8-2.0之间,会不会是RNA发生了降解,引起目的基因扩增不好?你是每个平行做三组吧 三组之间差别大怎么可能是模板问题呢 除非你说的是做三次差的多那我再做几次好了。之前也做过,都没这种问题啊。再请问一下,反转录后用cDNA做Actin的...

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恩 加样手抖了吧 平行性太差了

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Real time pcr目的基因Ct值相差1,内参差不多是怎么回事?做了2次都这样,不想是加样的问题 real-time PCR中内参基因的CT值做了几次real-time PCR ,选的18s做内参基因,是直接购买的,所以没有问题,但是测得的CT值在对照组中和实验组中均有误差,相差约0.3左右,想请问这样的误差正常吗?如果 Real-Time PCR中Ct Mean 还有Ct std.Dev 有劳各位大虾了! 请问real time PCR实验为什么要使用内参基因? real time PCR看家基因的选择重要吗 请问我在做荧光定量pcr的时候内参的ct值很低大约在35左右,而目的基因ct值在25左右 相对定量PCR是用目的基因拷贝数/内参拷贝数,还是用2-ΔΔCt值去分析?为什么有的文献是直接用前者? real-time PCR相对定量2 -△△CT法中用来判断扩增效率的标准曲线怎么制作?相对定量2 -△△CT法中建立标准曲线的目的是用来检测PCR的扩增效率的,那么这个标准曲线是如何制作的?我将未知浓度 real-time pcr 能测相同个体不同基因之间的的表达差异吗 real time PCR能测定基因组内某一基因的拷贝数吗 PCR怎么获得目的基因 real-time PCR的软件问题请问一下opticon monitor 3 软件,在分析Ct值的时候软件会自动算出每个样本的efficiency,这个值有什么作用? 北京哪里能做real time PCR real time PCR需要哪些试剂盒 real-time PCR 标准曲线请问real-time PCR 反应时,是否每一个基因都必须作一个标准曲线?不同的基因能在一块板上跑吗?(是否要考虑到不同的退火温度)为什么? 内参基因与目的基因的Ct值相差很大是什么原因 PCR,RT-PCR,GAPDH.real time之间的联系. RT-PCR和Real time-PCR有什么区别