western blot加一抗前忘了封闭会有什么后果?

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/12 06:41:35
western blot加一抗前忘了封闭会有什么后果?

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western blot加一抗前忘了封闭会有什么后果?

western blot加一抗前忘了封闭会有什么后果?
对你的目的条带影响不大 不过可能有会杂带 而且背景会不干净 不可能完全没影响 不然何必多这么个一小时的步骤

一般的说法是背景会高,影响信号的观察。不过我没有实际碰到过。。。

完全没有影响。一般还建议洗一至三次呢。 封闭后一般都要用TBST洗3次,但一定要TBS再洗一次后加一抗。 这个是强清洗剂,洗得多了会洗掉蛋白

什么叫没封闭?拿纸吸收不就可以了吗?

觉得影响还是有的,背景会很亮,有可能看不出条带。毕竟硝酸纤维膜和蛋白结合只是物理的吸附,与一抗和目的蛋白的结合的能力相同,要是洗的话,可能都会洗掉