有别人构建好的含有目的基因的表达载体质粒,但是只知道目的基因的mRNA序列,如何做PCR检测目的基因?

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/04/28 02:44:25
有别人构建好的含有目的基因的表达载体质粒,但是只知道目的基因的mRNA序列,如何做PCR检测目的基因?

有别人构建好的含有目的基因的表达载体质粒,但是只知道目的基因的mRNA序列,如何做PCR检测目的基因?
有别人构建好的含有目的基因的表达载体质粒,但是只知道目的基因的mRNA序列,如何做PCR检测目的基因?

有别人构建好的含有目的基因的表达载体质粒,但是只知道目的基因的mRNA序列,如何做PCR检测目的基因?
第一个办法 ,如果你有这个载体的通用引物,可以用这俩通用引物做PCR,然后电泳观察条带的大小,如果条带和你的mRNA的大小相近(应该是略大于mRNA的,因为带有了小部分的载体序列),那就说明这里边是插入目的基因的.
第二个办法,如果你能知道这个基因插入位点的酶切位点是什么的话,可以做双酶切来做鉴定,之后跑电泳看切出来的条带大小是否符合,注意如果切得完全的话应该是两条带,后边较大的是载体,前边的是你的mRNA.
如果没有通用引物但是有这个mRNA的两端引物,有人可以用这俩引物来PCR,但是这个方法不推荐,因为可能有没连接进去的rna污染会出现假阳性,因此一般还要配合酶切鉴定.

你这个基因想必是含有内含子了?是不是啊?如果已经不含内含子了,那就直接根据mRNA设计引物都可以的。一般设计15-20 bp。

根据mRNA序列对应的dna序列设计引物。只要批出目的片段就可以确定。

逆转录成DNA,就可以啦

有别人构建好的含有目的基因的表达载体质粒,但是只知道目的基因的mRNA序列,如何做PCR检测目的基因? 我已经有含有目的基因的T质粒了,怎样构建表达载体啊? 基因工程构建基因表达载体用到质粒的原因 基因疫苗质粒载体的构建 基因表达载体的构建 关于载体构建的问题我要构建一个GFP表达载体标记人体骨髓间充质干细胞的黏着斑,我想问一下这个载体的目的基因怎么获得?质粒载体用哪种比较好? 在基因表达构建载体中什么切割质粒什么切割目的基因,为什么? 目的基因与质粒反向连接为什么就不能正确表达我的意思是构建基因表达载体是为了让目的基因控制的基因序列表达,而不是让质粒与目的基因共同构成的基因序列表达,目的基因的基因序列 在构建基因表达载体时候,怎么利用选择培养基鉴别是质粒—质粒,目的基因—目的基因,还是质粒—目的基因 基因表达载体的构建能用天然的农杆菌Ti质粒吗 可以用构建好的插入了目的基因的表达载体重组质粒做southern吗换句话说,我没有转基因苗,怎么能得到southern检测的图片,先谢谢各位高手的指点! 基因表达载体的构建与将目的基因导入受体细胞的区别?基因表达载体不就是使目的基因导入受体细胞吗?谢谢回答··o(∩_∩)o...基因导入植物细胞是不是将基因表达载体植入Ti质粒中?还是只 如何构建一个能高效表达目的基因的表达型载体 基因表达载体的构建问题.这时候把目的基因植入表达载体里面,这个载体是和质粒一回事吗?基因植入载体后还要再植入受体,所以它是运输的作用吗?那么请问载体的作用除了运输之外?可是 构建的表达载体中插入目的基因可以是不能表达的序列吗?比如说整个序列都是内含子最后质粒导入到的受体细胞本身含有该内含子的能够表达的完整基因,我只是想了解该内含子的结构对完 什么是超表达载体?构建超表达载体的目的是什么?(详细一点)怎么用softberry预测基因? 大家好,我现在做细胞实验开始需要构建目的基因的过表达,不知道应该选用慢病毒载体还是腺病毒载体,标书 基因表达载体的组成包括复制原点吗?基因表达载体的组成只提到目的基因、启动子、终止子、标记基因。没有提复制原点,不知为什么。是不是以为质粒本身就有复制原点?