pcdna3.1作为载体的重组质粒转入大肠杆菌怎么检测筛选酶切了hindⅢ和EcoRⅠ,

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/07 18:12:17
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pcdna3.1作为载体的重组质粒转入大肠杆菌怎么检测筛选
酶切了hindⅢ和EcoRⅠ,

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pcDNA3.1本身就有抗性,可以用抗性培养基进行初步筛选,然后长出来的克隆筛选,一般为三种:
1.设计扩增外源基因片段的引物,进行菌液PCR
2.提取质粒,做质粒双酶切--Hind Ⅲ和EcoRⅠ(这个最为准确)
3.设计引物做测序

pcdna3.1作为载体的重组质粒转入大肠杆菌怎么检测筛选酶切了hindⅢ和EcoRⅠ, 质粒转染细胞不表达的问题~想研究某跨膜蛋白,构建真核表达质粒(构建了多种,载体有PCDNA3.1-FLAG,PCDNA3,1-V5,PCMV-5'端MYC,PCDNA3-5'FLAG,PCDNA3-5'HA),转染始终不表达,细胞换过293T,AD293,COS1,COS7等,转染操 1质粒作为基因工程的载体应具备那些条件? pet28a作载体的重组质粒转入大肠杆菌怎么检测筛选,酶切位点是NdeI和XhoI,可以用氨苄青霉素或蓝白斑筛选?貌似没有抗氨苄青霉素基因啊 质粒作为基因工程载体的优点 TI质粒可以作为载体的条件 基因表达载体和重组质粒的区别 用pcDNA3.1(+)作为表达载体,设计PCR引物时怎么能保正不移码?起始密码子前的碱基个数应该是多少? 重组质粒可以说是载体吗? 有关标记基因和受体细胞的筛选的问题在大肠杆菌的质粒上有抗四环素基因那么它作为标记基因和目的基因的载体形成重组质粒由于这个重组质粒与普通大肠杆菌中未重组的质粒一样具有四 目的片段转入表达载体后我用什么方法可以检测我的目的质粒? 为什么作为质粒的载体都是经人工改造的 质粒作为基因工程常用载体必须具备的条件 染色体和质粒都可以作为基因工程的载体么 我构建了一个基因的真核表达载体,转染293T细胞后以空质粒PCDNA3.1及未转染质粒的孔为对照,还有一个以PBS代替一抗的未转染质粒的孔为对照,结果只有PBS代替一抗的孔未被染色,其余孔都被染色 标记基因作为重组DNA载体的重要标记的问题大肠杆菌的某种质粒具有青霉素抗性基因(该基因可以认为是标记基因),当这种质粒与外源DNA组合在一起形成重组质粒.其中的“质粒与外源DNA组 受体细胞若能表达质粒载体上的抗性基因.则表明重组质粒成功导入为什么不对 谁说说质粒载体pet 22b的一些特点以及它作为质粒载体在DNA克隆中的优势?